Иммуноферментный анализ

 Из архива газеты «Новости А/О Юнимед»

 

Забозлаев А.Г., к.м.н. 

 

Атрофический гастрит - это заболевание, которое очень часто протекает бессимптомно или проявляется неспецифической симптоматикой. Он развивается медленно, в течение многих лет, и часто остаётся недиагностированным. Ранее полагали, что атрофический гастрит неизлечим. Однако многие современные исследования показали, что эрадикация инфекции Helicobacter pylori, которая является наиболее частой причиной данного заболевания, приводит к излечению атрофического гастрита. Если атрофический гастрит диагностирован и своевременно проведена терапия, риск развития таких заболеваний, как рак желудка и язвенная болезнь, существенно снижается. И наоборот, поздняя диагностика атрофического гастрита может привести к развитию деменции, повышению риска полинейропатии, ишемии миокарда и кровоизлияний в головной мозг по причине мальабсорбции витамина В12 и последующих нарушений метаболизма гомоцистениа и метионина в тканях и клетках. Ранее единственным методом диагностики атрофического гастрита была гастроскопия и гистологическое исследование биоптатов слизистой оболочки желудка.

Выделение H. pylori изменило понимание причин возникновения рака желудка и язвенной болезни. До 1982 года и длительное время после этого полагали, что язвенная болезнь развивается преимущественно как результат гиперсекреции кислоты, стресса и эмоционального перенапряжения. В действительности в 70-90% случаев основной причиной язвенной болезни является гастрит или мультифокальный атрофический гастрит, вызванный H. pylori-инфекцией. Другими причинами являются противовоспалительные анальгетики (НПВС). В 1994г. исследовательская группа под эгидой ВОЗ (IARC – международное агентство по исследованию рака) представила итоговые данные, основанные на результатах проведенных исследований, согласно которым инфицирование H. pylori коррелирует с развитием рака желудка. На основании этих данных H. pylori была признана высококанцерогенной инфекцией (канцерогенность класса 1).

 

Риск развития рака желудка у пациента, страдающего атрофическим гастритом с поражением тела желудка, в 5 раз выше по сравнению со здоровой популяцией. Если атрофические изменения тяжелой степени локализуются одновременно в антральном отделе и теле желудка, риск развития рака повышается в 90 раз. При поражении атрофическим гастритом только антрального отдела риск рака желудка повышается приблизительно в 20 раз. Помимо этого, риск развития пептической язвы повышается в 25 раз по сравнению со здоровой популяцией. Атрофический гастрит и ранние стадии рака желудка обычно бессимптомны или проявляются минимальной симптоматикой. В то же время выживаемость больных, которые подвергаются хирургическому лечению на ранних стадиях рака желудка, когда процесс ограничен слизистой оболочкой и подслизистым слоем, составляет примерно 90%. Прогноз же при поздних стадиях рака желудка, когда имеется яркая клиническая симптоматика, неблагоприятен – 5-летняя выживаемость после хирургического лечения составляет не более 10-20%. Таким образом, необходимость диагностики атрофического гастрита и рака желудка на ранних стадиях очевидна.

 

Однако до настоящего времени единственным методом диагностики атрофического гастрита у пациентов, страдающих диспепсией или проявлениями H. pylori-инфекции, было микроскопическое исследование биоптатов, полученных при гастроскопии. По причине того, что эта инвазивная процедура часто неприятна для пациента, дорогостоящая и не всегда доступна, лечение зачастую назначается на основании анамнеза и данных клинического осмотра. Неудивительно, что такой подход влечет за собой большое количество диагностических ошибок. Поэтому во всем мире ведется непрерывный поиск высокочувствительных неинвазивных и малоинвазивных методов ранней диагностики патологий желудочно-кишечного тракта.

 

Финской компанией Biohit разработана и запатентована уникальная тестовая панель GastroPanel, использование которой позволяет по анализу крови определить, страдает ли пациент гастритом, обусловленным H. pylori-инфекцией, является ли гастрит атрофическим и в каком отделе желудка локализуются изменения. Это достигается с помощью определения в сыворотке крови уровней пепсиногена I и гастрина-17, а также антител к H. pylori. Тестовая панель выявляет пациентов, у которых значительно повышен риск развития рака желудка и язвенной болезни, - таким пациентам показана немедленная гастроскопия с исследованием биоптатов. Кроме того, GastroPanel выявляет пациентов, у которых имеется аутоиммунный атрофический гастрит с поражением тела желудка и, поэтому высок риск нарушений, связанных с дефицитом витамина В 12.

 

Сравнение результатов, полученных с использованием GastroPanel фирмы Biohit и данных гистологического исследования биоптатов, взятых при гастроскопии, продемонстрировали высокую чувствительность (91%) и специфичность (96%) GastroPanel.

 

Гастрин 17 вырабатывается G-клетками антрального отдела желудка в ответ на стимуляцию несколькими факторами, включая белок пищи. Нормальные базальные уровни Гастрина17 < 2,5 пмоль/л и при высокой кислотности желудочного сока он может не определяться. Следовательно, чтобы оценить наличие и тяжесть атрофии необходима проба со стимуляцией белком. Нормальные стимулированные уровни вдвое превышают значения базального уровня. Обнаружено, что имеется положительная корреляция между величиной ответа и степенью атрофии антрального отдела желудка.

 

Пепсиногены являются предшественниками фермента пепсина. Пепсиноген I вырабатывается базальными клетками тела желудка. Имеется корреляция между потерей этих клеток вследствие атрофии и уровней Пепсиногена I. Уровни < 25 мкг/л указывают на то, что имеется умеренный или тяжелый атрофический гастрит с поражением тела желудка. Пепсиноген.

 

II вырабатывается во всех отделах желудка и двенадцатиперстной кишке. По мере увеличения тяжести атрофического гастрита с поражением тела желудка уменьшается соотношение сывороточного уровня Пепсиногена I и Пепсиногена II.

 

Инфицирование Helicobacterpylori приводит к развитию гастрита, который у 50% пациентов со временем трансформируется в атрофический гастрит, на фоне которого часто развивается рак желудка или пептическая язва. 

 

 Во всем мире H. pylori-инфекция диагностируется с помощью серологического, дыхательного тестов и антигенного исследования фекалий методом ПЦР. Эти тесты позволяют выяснить, инфицирован пациент или нет. Тестовая панель BIOHIT дает большее представление, чем эти тесты. На основании результатов получаемых только тестовой панелью можно диагностировать гастрит, его тяжесть и характер с тем же успехом, как при гастроскопии и исследовании биоптатов. С другой стороны, наборы входящие в тестовую панель (определение уровня пепсиногена I и гастрина-17) позволяют оценить состояние и функцию всей слизистой оболочки желудка. Соответственно тяжести атрофического гастрита с поражением тела желудка уровень пепсиногена I в крови понижается. Аналогичным образом параллельно выраженности атрофического гастрита антрального отдела желудка в крови понижается уровень гастрина-17 [4,7,14].

 

Атрофический гастрит не может быть надежно диагностирован только на основании гастроскопии, для этого необходимо исследование биоптатов. Необходимо заметить, что с помощью исследования нескольких биоптатов с поверхностью в 2-3 квадратных миллиметра невозможно оценить состояние и функцию всей слизистой оболочки желудка, составляющей 80000 кв.мм. В дополнение к этому, точность гастроскопии и гистологического исследования биоптата зависят от компетентности и загруженности эндоскописта и морфолога.

 

Данные, полученные с использованием GastroPanel, обрабатываются с помощью специальной компьютерной программы GastroSoft (программу можно опробовать на сайте www.boihit.com). Заключение по результатам исследования выдается в виде отчета компьютерной программы, представленного ниже.

 

 

На основании лабораторных результатов программа позволяет поставить наиболее вероятный диагноз H.pylori-инфекции и гастрита (в зависимости от тяжести заболевания и его топографии) или выдаёт заключение о нормальном и здоровом желудке. Кроме того, программа способна оценить риск развития рака желудка и язвенной болезни. Основываясь на рекомендациях Маастрихтского консенсуса (2000г.), программа дает рекомендации относительно необходимости проведения терапии, направленной на эрадикацию H. pylori]. Далее следуют инструкции по необходимости проведения гастроскопии, а также по определению в сыворотке уровней витамина B12 и гомоцистеина. В зависимости от симптомов пациента и результатов GastroPanel, программа GastroSoft даёт информацию о возможном риске развития рефлюкс-эзофагита и пищевода Барретта.

Атрофический гастрит с поражением тела желудка, вызванный H. pylori-инфекцией или аутоиммунным заболеванием приводит к мальабсорбции витамина В12. Дефицит витамина В12 вызывает повышение уровня гомоцистеина в тканях и клетках. Гомоцистеин является промежуточным продуктом метаболизма метионина. Повышенный уровень гомоцистеина в крови и тканях является сигналом тяжелых нарушений метаболизма метионина.

 

Дефицит витамина В12 в течение одного года может привести к необратимым повреждениям нервной системы и вызвать деменцию и другие неврологические заболевания. Они начинают развиваться до проявления первых признаков пернициозной анемии и часто приводят к необратимым повреждениям, если диагностика и лечение проводятся с промедлением. Имеется ряд исследований свидетельствующих о том, что повышенный уровень гомоцистеина увеличивает риск атеросклероза и поражения сосудов сердца и мозга.

 

GastroPanel BIOHIT и GastroSoft подходят для использования врачами общей практики и специалистами для диагностики H. pylori-инфекции и атрофического гастрита, а также для скрининга пациентов с риском рака желудка и язвенной болезни. Несмотря на то, что атрофический гастрит представляет собой тяжелое заболевание, он обычно остается “незамеченным и не диагностированным”. Одним из объяснений этого может быть тот факт, что единственным надежным методом диагностики атрофического гастрита было гистологическое (микроскопическое) исследование биоптатов, полученных при гастроскопии. Ранняя диагностика и правильное лечение атрофического гастрита предотвращает и снижает риск рака желудка и язвенной болезни [1,2]. Тестовая панель позволяет определить, связано ли заболевание пациента, страдающего деменцией, депрессией, инфарктом миокарда, инсультом головного мозга с атрофическим гастритом. Быстрая и ранняя диагностика в этой связи очень важна. Первопричина этих заболеваний может быть устранена, например, путем   проведения эрадикационной терапии против H. pylori-инфекции. В дополнение к этому, когда уровни витамина В12 и гомоцистеина уже определены, при помощи GastroPanel можно выявить тех пациентов у кого в основе заболевания лежит атрофический гастрит.

 

Учитывая тот факт, что более половины населения планеты инфицировано H. pylori, и в половине случаев это приводит к атрофическому гастриту. По этой причине представляется вполне обоснованным рутинное использование тестовой панели наряду с измерением артериального давления, холестерина и клиническим анализом крови.

 

GastroPanel была разработана для точной диагностики заболеваний желудка в случаях, когда эндоскопическое исследование недоступно или не может быть выполнено. Она также предназначена для оценки риска развития рака желудка, язвенной болезни и рефлюкс-эзофагита у пациентов с диспепсией. GastroPanel обеспечивает постановку точного диагноза на основании объективных данных. Исследование с использованием GastroPanel может быть полезным в следующих ситуациях:

2. Диагностика H. pylori-инфекции (распространенность в среднем около 50% населения земного шара) и атрофического гастрита (распространенность - приблизительно половина из числа инфицированных H. pylori), а также оценка риска по раку желудка (распространенность - приблизительно 0,1%) и язвенной болезни (распространенность - приблизительно 10%).

3. Диагностика атрофии тела желудка и выявление пациентов с высоким риском дефицита витамина B12. Этот дефицит может быть связан со многими заболеваниями, такими, как деменция и полинейропатии. Эти заболевания, связанные с дефицитом витамина B12, начинают развиваться значительно раньше появления каких-либо клинических симптомов пернициозной анемии. Эти болезни могут стать необратимыми, если диагностика и лечение проведены с промедлением. До 30% людей старше 65 лет страдают дефицитом витамина B12 (www.b12.com). 

 

 

GastroPanel является универсальным инструментом для неэндоскопической диагностики атрофического гастрита по анализу крови. Ранняя диагностика и эрадикация H. pylori являются основой для лечения атрофического гастрита и предотвращения связанных с ним заболеваний [1,2,6,15]. GastroPanel позволяет неэндоскопическим методом выявлять пациентов с высоким риском рака желудка и язвенной болезни, как у молодых, так и в старших возрастных группах.